电泳(Electrophoresis)是指带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象称为电泳。大分子的蛋白质,多肽,病毒粒子,甚至细胞或小分子的氨基酸,核苷等在电场中都可作定向泳动.1937年Tiselius成功地研制了界面电泳仪进行血清蛋白电泳,它是在一U型管的自由溶液中进行的,电泳后用光学系统使各种蛋白所形成折光率差别成为曲线图象,将血清蛋白分为白蛋白,α1-球蛋白,α2-球蛋白,β-球蛋白和γ-球蛋白五种,随后,Wielamd 和Kanig 等于1948年采用滤纸条做载体,成功地进行了纸上电泳。从那时起,电泳技术逐渐被人们所接受并予以重视,继而发展以滤纸,各种纤维素粉,淀粉凝胶,琼脂和琼脂糖凝胶,醋酸纤维素薄膜,聚丙烯酰胺凝胶等为载体,结合增染试剂如银氨染色,考马斯亮蓝等大大提高和促进生物样品着色与分辨能力,此外电泳分离和免疫反应相结合,使分辨率不断朝着微量和超微量(1ng~0.001ng)水平发展,从而使电泳技术获得迅速推广和应用。在此主要介绍常用电泳的一般原理及其应用。
等电聚焦电泳
是将两性电解质加入盛有pH梯度缓冲液的电泳槽中,当其处在低于其本身等电点的环境中则带正电荷,向负极移动;若其处在高于其本身等电点的环境中,则带负电向正极移动。当泳动到其自身特有的等电点时,其净电荷为零,泳动速度下降到零,具有不同等电点的物质最后聚焦在各自等电点位置,形成一个个清晰的区带,分辨率极高。
酸洗液一般是由无机酸加上定量的缓鉵剂,抑制剂或者表面活性剂等涂加剂制成的,它们的性能和处理效果不仅取决地其中起主导作用的酸种类和性能,而且还取决于这种酸与其中添加剂的成份及其在水中的含量和之间的配比。酸洗原理中最重要的一点是酸与铁作用时产生氢气,使金属基体表面的氧化皮机械的剥落,氢气既有使基体表面氧化皮剥落的正面作用,同时过量的氢气又有腐鉵金属的品格,导致金属表面充氢,使金属变脆的负面影响,为了减轻“氢脆“对基体的损伤,在酸中加入合适的缓鉵剂,缓鉵剂能在金属基体表面形成一层分子膜,以阻碍酸的进一步作用,从而达到缓蚀的目的,抑制剂则有抑制氢气的掸发比而起到减轻酸雾挥发的作用,在酸液中加入一定量的表面活性剂,可使洗液具有除油除锈的双重作用。
电泳涂装前表面处理的目的主要是:清除涂膜与涂件表面的障碍,排除影响二者结合的因素如油污,锈渍,氧化皮及其它杂质,为电泳涂装提供如下良好条件:
导电良好,平整度高的表面。
有一个均匀,细致,膜厚1~3μm,导电仍良好的保护膜(磷化膜)该膜不仅可以防止预涂件在电沉积前不返锈,而且可以提高涂膜的附着力及其质量。
预涂件表面洁净度极高,。不污染电泳槽液。
涂件表面仍湿润,以利于电沉积。